Культивирование эмбрионов в средах ЭмбриоГен и БластГен

Цитокины — это сигнальные молекулы, с помощью которых осуществляется общение между эмбрионом и эндометрием, поэтому их наличие так важно для наступления беременности. Вынашивание беременности напрямую зависит от уровня данного цитокина — у женщин с привычным невынашиванием отмечается его низкий уровень (близок к нулю). При естественном зачатии от момента оплодотворения до имплантации эмбрион развивается в среде, богатой цитокинами и факторами роста.

• От адекватного баланса ростовых факторов и цитокинов зависит пролиферация и дифференцировка эмбриональных клеток, взаимодействие бластоцисты с эндометрием в момент имплантации, сам процесс имплантации, иммунная толерантность материнского организма по отношению к эмбриону и последующее прогрессирование беременности (N. Lédée et al., 2011).
• Цитокин GM-CSF, первоначально известный как стимулятор пролиферации и дифференцировки гранулоцитов и моноцитов, играет огромную роль в реализации репродуктивной функции. Рецепторы к цитокину GM-CSF обнаруживаются на мембране эмбриональных клеток уже на стадии двух бластомеров (S. A. Robertson, 2007).
• Цитокин GM-CSF синтезируется клетками фолликулов, эпителия фаллопиевых труб и эндометрия; во время беременности GM-CSF вырабатывается клетками трофобласта, а впоследствии – плаценты. Уровень экспрессии GM-CSF не одинаков и меняется как в течение менструального цикла, так и с наступлением беременности. Всплески секреции GM-CSF наблюдаются после попадания эякулята в репродуктивный тракт, во время оплодотворения и имплантации (D.J. Sharkey, S.A. Robertson, 2010).
• Мутация по гену GM-CSF вызывает нарушение формирования плаценты, резорбцию плодов, увеличение частоты прерывания беременностей и постнатальной гибели детёнышей у мышей. Добавление GM-CSF в среду для культивирования эмбрионов мыши позволяет увеличить частоту получения и качество бластоцист, нормализует метаболизм эмбриона и, более того, позволяет избежать некоторых негативных последствий культивирования in vitro, проявляющихся в постнатальном развитии детенышей (S. A. Robertson, 2007)

Среда ЭмбриоГен достаточно дорогая, поэтому ее использование ограничивают, чтобы не увеличивать стоимость программ ЭКО.

Положительное влияние добавления цитокина GM-CSF в культуральные среды было подтверждено исследованиями на эмбрионах млекопитающих и человека (Sjoblom C et al., 1999).

S. Ziebe и другие провели проспективное рандомизированное двойное слепое плацебо-контролируемое исследование (S. Ziebe et al., 2013) . В данном исследовании, проведённом на базе 11 шведских и 3 датских клиник, приняли участие 1332 женщины, был произведён перенос 1151 эмбриона.

Исследование показало, что использование среды ЭмбриоГен достоверно увеличивает частоту прогрессирующих клинических беременностей и частоту рождения детей, снижая при этом частоту потерь беременности до 12 недель по сравнению со стандартной системой культивирования. При этом положительный эффект использования ЭмбриоГен оказался наиболее выраженным в подгруппе пациенток с прерыванием беременности в анамнезе (289 циклов с переносом эмбриона).

• в этой сложной когорте было показано увеличение частоты имплантации на 44% (24,5% против 17,0%);
• частоты прогрессирующих клинических беременностей - на 40% (23,2% против 16,5%);
• частоты рождения детей – на 28% (26,9% против 23,1%) в группе GM-CSF по сравнению со стандартной системой культивирования.

Кроме того, было отмечено снижение частоты биохимических беременностей (отсутствие плодного яйца на УЗИ после положительного анализа на ХГЧ) – 3,8% против 20,4% (Р=0,03) в контрольной группе.

• Возможным объяснением особой эффективности среды ЭмбриоГен в подгруппе пациенток с прерыванием беременности в анамнезе является участие цитокина GM-CSF в регуляции взаимодействия имплантирующегося эмбриона с эндометрием и установления иммунной толерантности материнского организма по отношению к имплантирующемуся эмбриону.
• Доказана роль GM-CSF в активации презентации отцовских антигенов дендритными клетками и макрофагами эндометрия (Moldenhauer LM et al., 2010), в смещении баланса Th1/Th2 в сторону Th27, регуляции популяции uNK клеток. При дефиците цитокина GM-CSF течение данных процессов может быть нарушено, что делает наступление и прогрессирование беременности невозможным.
• Культивирование и перенос эмбрионов в среде ЭмбриоГен, возможно, позволяет восстановить адекватный баланс цитокинов и обеспечить возможность имплантации эмбриона и прогрессирования беременности (S. Ziebe et al., 2013).

В ходе проведения исследования родилось 358 детей, из них 194 – благодаря среде ЭмбриоГен. Последний ребёнок в рамках исследования был рождён в марте 2011 года.

• Было показано отсутствие достоверных различий в весе новорожденных, частоте врождённых пороков развития и сроке родоразрешения между опытной и контрольной группами.
• В обеих группах значения данных показателей были предсказуемы и соответствовали популяционным.