Развитие эмбриона после ЭКО по дням
Эмбриологический лист отражает все этапы работы, которые эмбриолог провел с клетками и эмбрионами пациента. В него заносится информация с момента получения ооцитов и спермы до момента переноса или криоконсервации эмбрионов, а именно оценка полученных ооцитов в день пункции, данные спермограммы, метод оплодотворения, оценка оплодотворения и этапы развития каждого эмбриона до 6го дня. По сути, это все, что происходит с вашими клетками и эмбрионами в лаборатории.
Эта информация помогает эмбриологам контролировать программу ЭКО, а также в случае неудачной попытки правильно подготовить пациента к следующей: внести необходимые изменения в протокол.
Насколько подробная информация занесена в эмбриологический лист хорошо говорит о контроле качества в лаборатории.
Чем больше информации занесено, тем лучше и качественнее эмбриологи могут провести статистический анализ данных, исключить ошибки на ранних этапах и в последующем улучшить протоколы процедур. История развития каждого эмбриона позволяет выбрать лучший эмбрион.
Что происходит в «0 день»?
В этот день у женщины на пункции получают яйцеклетки, которые окружены гранулезными клетками (кумулюсом). Из-за плотного слоя гранулезных клеток качество и зрелость яйцеклеток сразу определить точно невозможно, их не видно.
Мужчины сдают сперму, и по показателям спермограммы эмбриолог принимает решение о методе оплодотворения: ЭКО, ИКСИ или ИМСИ. В зависимости от метода оплодотворения яйцеклетки либо очищаются от гранулезных клеток (ИКСИ, ИМСИ, ПИКСИ), либо нет (ЭКО). После чистки проводится точная оценка состояния ооцита. Ооциты могут быть зрелыми (MII), незрелыми (MI и GV) или дегенеративными (Deg).
В зрелых, готовых к оплодотворению ооцитах определяется первое полярное тельце. В эмбриологическом протоколе зрелый ооцит обозначают MII. В ядрах зрелых ооцитов 23 хромосомы, в незрелых - 46 хромосом, поэтому их использование неэффективно.
При нарушениях процессов созревания ооцита в фолликуле или при неправильно введеном триггере (ХГ) при стимуляции существует большая вероятность получения незрелых клеток, обозначаемых – MI и GV. Возможна и полная дегенерация ооцита (Deg). При проведении ИКСИ или ИМСИ в каждую зрелую клетку эмбриолог вводит один сперматозоид. При ЭКО к неочищенным клеткам добавляют обработанные специальными растворами сперматозоиды.
Затем оплодотворенные яйцеклетки ставят в инкубатор.
Что происходит в «1 день»?
Через 18-20 часов после добавления сперматозоидов или ИКСИ (1-е сутки) оценивают произошло оплодотворение или нет. Если оплодотворение прошло нормально образуются два пронуклеуса. Это предшественники ядер будущих клеток-бластомеров, на которые начинает делиться оплодотворенная яйцеклетка. При правильном оплодотворении оба пронуклеуса четко различимы, их обозначают 2pN.
Если пронуклеусов не видно, то скорее всего оплодотворение не случилось (0pN). Иногда мы наблюдаем 1 пронуклеус (1 pN), в этом случае оплодотворение произошло, но за такими эмбрионами нужно пристально наблюдать, как правило, они имеют сниженный потенциал развития. Если мы наблюдаем 3 и более пронуклеусов, то оплодотворение произошло неправильно. «Неправильно» оплодотворенные ооциты не пригодны для дальнейшей работы и утилизируются.
Что происходит на «2 день»?
Пронуклеусы исчезают и эмбрионы начинают делиться. Оценка качества эмбрионов проводится через 40-42 часа после оплодотворения. Эмбриологи используют численно–буквенную систему оценки качества, где цифра означает количество бластомеров, а буква - их качество. Для обозначения эмбриона отличного качества используется буква «А», хорошего - «B», низкого - «С».
Для второго дня культивирования перспективными считаются эмбрионы - 4А, 4В, 5A, 5B.
Что происходит на «3 день»?
Эмбрионы продолжают делиться. Оценка качества эмбрионов проводится через 72-74 часа после оплодотворения. В идеале дробление эмбриона должно быть симметричным (получаются бластомеры одинакового размера) и равномерным (все бластомеры претерпевают деление).
Для третьего дня культивирования перспективными считаются эмбрионы с восьмью и более бластомерами (8А, 8В, 9А, 9В, 10А, 10В).
Что происходит на «4 день»?
К концу третьих и на четвертые сутки культивирования эмбрион начинает компактизацию - границы его клеток становятся неразличимы. Обычно оценка эмбрионов на четвертые сутки не проводится из-за малой информативности данной стадии развития. При проведении предимплантанционного генетического теста (ПГС) на этой стадии проводят хетчинг эмбрионов - проделывают отверстие в оболочке эмбриона.
Что происходит на «5 и 6 день»?
На пятые-шестые сутки, в идеале через 120 часов и более после оплодотворения эмбрион образует бластоцисту. Это стадия развития эмбриона, эмбрион на этой стадии похож на полый шар, внутри которого к стенке прикрепляется плотный комок клеток (внутриклеточная масса), стенки большого шара называют трофэктодермой. Впоследствии трофэктодерма участвует в образовании плаценты, а внутриклеточная масса — в образовании плода.
Оценка качества бластоцист учитывает ее размер, который отражается цифрами от 1 до 5; состояние внутренней клеточной массы (ВКМ) (от «A» до «С») (первая заглавная буква) и окружающих ее клеток – трофэктодермы (от «A» до «C»)(вторая заглавная буква).
Лучшими для переноса будут бластоцисты размера от 3 до 6, имеющие многоклеточную ВКМ и трофэктодерму – 3AA, 3AB, 3BB, 4AA, 4AB, 4BB, 5AA, 5AB, 5BB, 6AA, 6AB, 6BB.
Когда делают перенос (обозначение ET)?
Перенос можно делать в любой день развития. Вероятность беременности выше при переносе на 5 день развития. Для успешной имплантации бластоцисте необходимо выйти из окружающей ее блестящей оболочки и закрепиться в эндометрии. Эмбриолог может помочь бластоцисте выйти из оболочки, сделав отверстие. Данная процедура называется хетчинг. Ее проводят непосредственно перед переносом.
Когда эмбрионы замораживают?
Обычно замораживают эмбрионы на 5-6 день развития, когда они достигают стадии бластоцисты. Таким образом, эмбрионы живут в лаборатории максимум 7 дней. В итоге, на эмбриологическом листе можно увидеть таблицу, в которой каждая манипуляция фиксируется. Судьбу и развитие каждого эмбриона можно проследить. Такое возможно, если в лаборатории не используется групповое культивирование эмбрионов, а каждый эмбрион занимает свою каплю со средой.
Зрелость и метод оплодотворения |
День после пункции |
Итог по развитию |
Объяснение эмбриолога |
||||||
0 |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
|||
1 |
MII |
2pN |
4a |
8a |
mor |
4AA |
Криоконсервация или перенос |
Идеальное развитие |
|
2 |
MII |
1pN |
4b |
10b |
16b |
1BB |
4BB |
Криоконсервация |
Очередность переноса после 2pN-эмбрионов |
3 |
MII |
3pN |
Утилизация |
Неправильное оплодотворение |
|||||
4 |
MII |
0pN |
0pN |
Утилизация |
Оплодотворения не было |
||||
5 |
MII |
0pN |
4b |
9b |
mor |
4BB |
Криоконсервация или перенос |
Очередность переноса после 2pN-эмбрионов после 1 pN-эмбрионов |
|
6 |
MII |
2pN |
3b |
6c |
6c |
6c |
6с |
Утилизация |
Остановка в развитии с 3-го дня |
7 |
MII |
2pN |
2a |
4a |
8a |
mor |
3BB |
Криоконсервация |
Хорошее развитие |
8 |
ЭКО |
2pN |
4а |
10а |
mor |
1AB |
5AB |
Криоконсервация |
Отличное развитие |
9 |
ЭКО |
MI |
Утилизация |
Незрелая клетка |