Культивирование эмбрионов
Культивирование эмбрионов — это процесс получения и выращивания эмбрионов в искусственных условиях вне человеческого организма, в результате которого эмбрионы обеспечиваются всем необходимым для жизни и развития. Максимальное время нахождения эмбриона в лаборатории — 7 дней.
Как культивируют эмбрионы?
Культивирование в условиях лаборатории начинается с момента получения ооцитов на пункции. Ооцитам жизненно важно находиться при температуре 370С и атмосфере с повышенным содержанием СО2 (около 5-6%), поэтому яйцеклетки сразу помещают в инкубатор.
Инкубатор — это устройство, которое имитирует организм женщины, а именно поддерживает определенную температуру, газовый состав воздушной среды, влажность, внешне он похож на холодильник.
После процедуры оплодотворения яйцеклеток сперматозоидами начинается культивирование эмбрионов. В большинстве ЭКО-лабораторий мира эмбрионы культивируются в каплях специальной культуральной среды, которые находятся в чашке и покрыты слоем минерального масла. Чашки с эмбрионами должны постоянно находиться в инкубаторе и могут покидать его лишь на несколько минут для ежедневных рутинных процедур. В каплях и находятся эмбрионы. Без увеличения увидеть их невозможно, такие они маленькие. Для манипуляций с эмбрионами используется микроскоп.
Как обеспечивается безопасная работа инкубаторов в лаборатории?
В нашей лаборатории многоступенчатый контроль качества осуществляется в соответствии с международной организацией Коллегия американских патологов (СAP), что дает высокую степень защиты от непредвиденных ситуаций. Помимо манипуляций с эмбрионами роль эмбриолога — не допустить сбой в работе инкубатора. Эмбриолог каждый день контролирует инкубатор, измеряя независимым прибором концентрацию CO2 и температуру. Если значения выходят из допустимого диапазона, то эмбриолог их корректирует. Каждый инкубатор в нашей лаборатории подключен к общей сигнализации и при сбое оповещает о проблеме.
Для того чтобы поддерживать определенный состав воздушной среды к каждому инкубатору подведен углекислый газ, причем две независимые линии, состоящие из нескольких баллонов газа, которые можно заменять по мере использования. Если в одной линии заканчивается газ, то идет автоматическое переключение на другую линию.
Для работы инкубаторов необходимо бесперебойное питание электроэнергией, поэтому в лабораторию проведено две линии электроснабжения. Если на обеих линиях проблемы, то включается источник бесперебойного питания – генератор.
Что нужно эмбрионам для развития?
Эмбрион должен постоянно находиться в условиях, приближенных к естественным.
В этом ему способствует:
- культуральная среда, обогащенная всеми необходимыми веществами, под слоем минерального масла, чтобы поддерживать влажность;
- темнота. В нашей лаборатории на микроскопах установлен датчик движения света, чтобы эмбрионы освещались только в тот момент, когда на них смотрит эмбриолог. При манипуляциях вне инкубатора это минимизирует нахождение эмбрионов на ярком свете.
- чистый воздух. В лаборатории используются бактерицидные Hepa-фильтры плюс работает система вентиляции.
- температура около 37,0. Для манипуляций с клетками и эмбрионами мы используем подогреваемые столы, а также другие необходимые инструменты (иглы, пробирки и т.д.);
- содержание СО2 около 6%, содержание О2 не более 21%.
Стоимость услуг
Эмбриологи, которым можно доверять
Харитонова Маргарита Александровна
Апрышко Валентина Петровна
Кириенко Константин Владимирович
Сколько эмбрионов дорастает до стадии бластоцисты в результате культивирования?
Из эмбрионов, у которых на первый день развития наблюдали правильное оплодотворение, до стадии бластоцисты дорастает 40-50% эмбрионов. Процент зрелых клеток после пункции около 75-80%. Правильно оплодотворяются 75-80% эмбрионов.
То есть если на пункции у вас получили 10 яйцеклеток, то в среднем количество полученных бластоцист на конец культивирования будет 2-3 бластоцисты.
Какие культуральные среды используются?
В нашей лаборатории используются среды со сертификатами качества, пригодные для работы в эмбриологической лаборатории. Каждая партия среды культуральных сред проверяется на осмолярность и pH, а также проходит тест выживаемости сперматозоидов.
Как оценить качество эмбриологической лаборатории?
Важными показателями успешной работы лаборатории являются:
- количество инкубаторов на количество пункций. В нашей лаборатории 16 инкубаторов именно для культивирования. Среднее число пункций в месяц около 250. Таким образом, во время культивирования в одном инкубаторе находится не более 3 пациентов одновременно;
- количество эмбриологов и их квалификация;
- для выполнения всех необходимых, часто дублирующих процедур, необходимо достаточное количество сотрудников. В отделе эмбриологии на сегодняшний момент 16 эмбриологов, каждый день в лаборатории работает минимум 6 человек.
- ежедневный контроль инкубаторов, мониторинг условий, проверка приборов;
- наличие протоколов — четко прописанный алгоритм действий по каждой процедуре. Стандартизация работы позволяет более точно отслеживать статистику.
- наличие сигнализации на инкубаторах;
- постоянный сбор статистических данных. В нашей лаборатории эмбриологи активно участвуют в обработке и сборе статистики, чтобы затем оценить качество проделанной работы.
Почему эмбрионы культивируют 6 дней?
В естественных условиях эмбрион попадает в матку на 4-й день развития, поэтому физиологичнее доращивать эмбрионы до бластоцисты, а затем делать перенос. В матке эмбрион ищет себе место для имплантации и имплантируется в эндометрий на 6-7 день развития.
Как можно вырастить больше бластоцист?
В нашей клинике разработан новый метод культивирования «Культивирование в звуковой среде», приближенный к более физиологичным условиям. В основе лежит возможность передавать акустические колебания непосредственно в культуральную чашку, где выращиваются эмбрионы. В качестве звуковых колебаний могут быть использованы заранее записанные с помощью фонендоскопа звуки в организме матери, звуки музыки различных жанров, звуки моря, речь будущей мамы или будущего папы.
Результаты показали увеличение на 6% успеха оплодотворения и на 20% выросло число эмбрионов, сформировавших бластоцисты.
В чем преимущества «культивирования в звуковой среде» перед обычным культивированием?
Чтобы оказаться в матке, эмбрион, а до этого и яйцеклетка, проходят путь от яичника через маточные трубы до матки. Этот процесс сопровождается движением ресничек в маточной трубе и движением трубной жидкости вокруг эмбриона. Также в утробе матери эмбрион подвергается воздействиям звуковых (биение сердца, разговоры матери) и механических колебаний при движении, ходьбе и других процессах повседневной жизнедеятельности. Создается специфическая микрогидродинамическая и акустическая система, в которой идет развитие эмбриона.
В условиях лаборатории эмбрион культивируется в небольших каплях среды в статичных условиях на полке инкубатора, и концентрация токсичных для эмбриона агентов (аммоний и др.), возрастает вблизи эмбриона в процессе культивирования.
В статичной культуральной системе негативный эффект накопления метаболитов решается только заменой культуральной среды на свежую. А при воздействии вибрации происходит постоянное перемешивание среды, и локальная концентрация токсичных метаболитов снижается. Также вибрация вызывает изменение внутриклеточного обмена кальция и увеличение синтеза факторов роста.
Мы провели исследование на 1000 ооцитах, разделив их на две группы. Одна группа культивировалась под воздействием звуковых волн определенной громкости (не более 80 дцб) в модифицированном инкубаторе, а вторая — в тишине в обычном инкубаторе. Мы показали, что вибрация от музыки положительно влияет на процесс развития эмбрионов, то есть увеличивается вероятность правильного оплодотворения яйцеклетки (на 6%) и процент формирования бластоцист (на 20%), что важно для получения беременности.
Что значит «можно позвонить своим эмбрионам»?
Некоторые пациенты психологически тяжело переносят разлуку со своими эмбрионами даже на время культивирования, поэтому для них есть возможность «общаться» с эмбрионами с помощью мобильной связи. Пациенты могут сделать звонок по обычному сотовому телефону в инкубатор на специально выделенный номер, где культивируются их эмбрионы, и передать им звуковые колебания своей речи.