Как происходит разморозка эмбрионов

Замороженные эмбрионы и яйцеклетки хранятся в больших резервуарах, наполненных жидким азотом. Такой резервуар по сути представляет собой большой термос и называется сосудом Дьюара. За каждым пациентом закреплено специальное место внутри сосуда Дьюара, где хранятся его яйцеклетки и/или эмбрионы. 

Носители, на которых находятся эмбрионы, имеют цветовую дифференцировку и промаркированы уникальной идентификационной информацией о пациенте. Она включает в себя ФИО пациента, номер карты, номер в журнале, дату заморозки, а также номер и качество эмбриона.

В процессе развития эмбрионы культивируются в индивидуальных каплях, а затем замораживаются по одному, гораздо реже по два на носителе. Это позволяет эмбриологам отследить динамику развития и качество каждого эмбриона, что делает возможным выбор самого лучшего эмбриона на перенос. Кроме того, данный подход позволяет избежать повторных циклов заморозки/разморозки.

При температуре жидкого азота все биологические процессы в клетке останавливаются (замирают). В теории это означает, что эмбрионы и яйцеклетки могут храниться при таких условиях сколь угодно долго. А что на практике? Исследования показывают, что выживаемость и качество яйцеклеток и эмбрионов после разморозки остаются неизменно высокими вне зависимости от продолжительности хранения. Данные, полученные за последние 10 лет, позволяют убедиться в том, что долгосрочное хранение витрифицированных бластоцист не приводит к снижению вероятности имплантации, а также вероятности наступления и вынашивания беременности.

Разморозка начинается с выбора эмбриона на перенос. Зачастую у пациентки заморожено несколько эмбрионов. В первую очередь будет разморожен и перенесен эмбрион, шансы которого на имплантацию и наступление клинической беременности оцениваются как максимальные. При выборе эмбриона эмбриолог руководствуется днем развития эмбриона на момент заморозки, а также качеством эмбриона и динамикой его развития. 

Первое на что обращает внимание эмбриолог при выборе эмбриона это день, на который эмбрион был заморожен. Согласно данным многочисленных исследований, вероятность наступления клинической беременности выше при криопереносе эмбрионов 5-го дня по сравнению с эмбрионами 6-го дня. Это объясняется в том числе тем фактом, что бластоцисты с более быстрой динамикой развития, сформировавшиеся на 5-е сутки, ассоциированы с более низкой частотой анеуплоидии. Поэтому при выборе эмбриона на перенос предпочтение отдается эмбрионам 5-го дня. 

Следующим критерием отбора эмбриона является его качество. Эмбриолог учитывает качество внутриклеточной массы и трофектодермы, а также степень экспансии, т.е размер эмбриона. При наличии двух и более эмбрионов одинакового качества выбор эмбриона на перенос осуществляется исходя из динамики развития и качества эмбрионов на 3-е сутки развития.

Перед разморозкой идентификация данных на носителе и подтверждение их соответствия данным пациента обязательно проводится двумя эмбриологами. Двойной контроль сводит к нулю вероятность ошибки и применяется на всех этапах работы с эмбрионами. 

Также, как и при заморозке, ключевым фактором, влияющим на эффективность разморозки, является высокая скорость. Поэтому первый этап разморозки эмбрионов происходит при температуре 37 градусов. Кончик носителя с эмбрионом помещается из жидкого азота непосредственно в раствор нагретый до 37 градусов. Второй этап разморозки эмбрионов проводится при комнатной температуре и заключается в постепенном замещении криопротектора и регидратации эмбриона. Для этого эмбрион последовательно перемещают из раствора с большей концентрацией криопротектора в раствор с меньшей концентрацией криопротектора, в то время как конечный раствор уже не содержит криопротектора. Такое плавное снижение концентрации криопротектора имеет критическое значение и позволяет избежать повреждений эмбриона, связанных с осмотическим шоком. По окончании разморозки эмбрион переносят в чашку для культивирования и помещают в инкубатор.