Подготовка спермы к оплодотворению

В настоящее время в нашей лаборатории применяются такие методы обработки спермы перед оплодотворением, как метод двукратного градиента плотности, с последующей отмывкой сперматозоидов и их флотацией и метод микрофлюидной селекции сперматозоидов.

В день оплодотворения пациент сдает сперму дважды, т.к. для обработки используется второй образец спермы. При получении второго эякулята через короткий интервал времени (до 1 часа), особенно у пациентов с нарушением параметров спермы, увеличивается доля морфологически нормальных и прогрессивно подвижных сперматозоидов, а также снижается уровень фрагментации ДНК. Перед пробоподготовкой проводится подсчет концентрации, подвижности и морфологии сперматозоидов в эякуляте как для спермограммы. Подсчет этих параметров необходим для выбора оптимального способа пробоподготовки. В зависимости от концентрации и подвижности сперматозоидов могут использоваться растворы с отличными от стандартных градиентами плотности, либо используется иной метод пробоподготовки.

Метод двукратного градиента плотности используется для отделения подвижных морфологически нормальных сперматозоидов от семенной плазмы, клеточного дебриса, незрелых клеток, лейкоцитов. Этот метод позволяет отобрать фракцию подвижных морфологически нормальных сперматозоидов, которые могут использоваться как для интрацитоплазматической инъекции сперматозоидов (ICSI, IMSI, Piezo-ICSI/IMSI, PICSI), так и для классического ЭКО (добавление суспензии сперматозоидов к ооцит-кумулюсным комплексам).

Метод подготовки сперматозоидов к оплодотворению, связанный с микрофлюидной селекцией сперматозоидов, максимально приближен к естественному. Чип для микрофлюидики представляет собой небольшую камеру, расположенную на инертной пластиковой основе, разделенную специальной мембраной. Мембрана имеет отверстия, диаметр которых позволяет пройти через них морфологически нормальному сперматозоиду. Нижняя часть камеры плавным движением заполняется спермой, а верхняя часть наполнена специальной средой. Состав среды максимально приближен к жидкости маточных труб (место, где в естественных условиях происходит оплодотворение и раннее развитие эмбриона до имплантации в полости матки). Таким образом, сперматозоид проходя через мембрану движется против тока жидкости, также, как происходит его [сперматозоида] движение в половых путях женщины. Стоит отметить, что исследования, проведенные в разных клинических центрах, в том числе и у нас, показали, что использование чипов для микрофлюидики снижает количество сперматозоидов с фрагментированной ДНК по сравнению с нативным образцом. Как и после метода двукратного градиента плотностей сперматозоиды после прохождения через мембрану чипа можно использовать и для ICSI, и для классического ЭКО.

Как было указано выше, перед пробоподготовкой проводится подсчет концентрации, подвижности и морфологии сперматозоидов в эякуляте. Это - постоянно изменяющиеся параметры, не являющиеся константой для каждого человека. Поэтому, чтобы уменьшить факторы, которые могут отрицательно повлиять как на текущие показатели, так и на результат всей программы, стоит следовать ряду рекомендаций:

• Отказаться от вредных привычек, т.к. алкоголь и курение губительны для сперматозоидов;
• Обсудить прием медицинских препаратов с лечащим врачом, т.к. некоторые из них могут значительно влиять на качество спермы;
• Соблюдать тепловой режим, т.к. перегрев яичек (сауна, баня, горячая ванна, значительный подогрев сиденья в авто), а также нарушение кровообращения в области мошонки (тесное белье и одежда) отрицательно сказываются на параметрах спермограммы и качестве сперматозоидов.